pcDNA3.1(+)线性化载体（无缝克隆用）

产品名称和规格：

货号	产品名称	规格	价格（元）
SC-Z001-20	pcDNA3.1(+)线性化载体	20μl/20T	880.00

产品介绍：

pcDNA3.1(+)是源自pcDNA3的5.4kb载体，专为在哺乳动物宿主中高水平稳定和瞬时表达而设计。在大多数哺乳动物细胞中可以进行高水平的稳定和非复制性瞬时表达。载体包含以下元件：人巨细胞病毒即刻早期（CMV）启动子在多种哺乳动物细胞中高水平表达；用于筛选稳定细胞系的新霉素抗性基因等。

基因克隆方法应用广泛的有酶切连接克隆和无缝克隆，酶切连接克隆的载体制备对于新手来说比较麻烦，需要准备载体以及PCR产物还需要进行酶切和回收等多个步骤。无缝克隆只要准备好载体，PCR产物回收后可以直接用于连接，大大缩短试验时间。

使用方法：

1、本产品是将pcDNA3.1（+）载体用BamHI和XhoI双酶切后，回收的线性化载体。

2、无缝克隆引物设计方法，当做克隆载体使用，可以在扩增PCR产物的：

（1）上游引物5’端添加序列：TTAAGCTTGGTACCGAGCTCGGATCCACCATG。（其中划线部分为载体上的序列，CCACCATG为KOZAK序列，ATG为翻译起始位置，注意不要移码。）

（2）下游引物5’端添加序列：TAAACGGGCCCTCTAGACTCGAGTCA。（其中划线部分为载体上的反向序列，TCA为终止密码子）。

3、测序引物

（1）上游引物T7：TAATACGACTCACTATAGG

（2）下游引物BGH：TAGAAGGCACAGTCGAGG